摘要：红景天为景天科，红景天属植物。即是本属一种的名称，也是本属统称，其中许多种均可用于提取本药物。红景天提取物通过改善T-细胞免疫而使免疫系统恢复正常。可提升机体对感染逐渐发展所积聚成的毒的抵抗能力。

　　目的建立高效液相色谱法测定红景天酒中红景天苷含量的方法。方法色谱柱为Shim-packVP-ODSC18(250mm×4.6mm，5.0μm)，流动相甲醇-水(18∶82)，检测波长为278nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。结果红景天苷进样量在0.072～1.296μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999)，平均回收率为98.90﹪，RSD为1.32﹪。结论该法灵敏度高，操作简便，结果准确可靠，可用于红景天酒中红景天苷含量的测定及其质量控制与评价。

　　1仪器与试药

　　LC-2010AHT高效液相色谱仪，包括SPD-10A型紫外检测器、SIL-20A自动进样器、LASSVP6.12SP4色谱工作站(日本岛津公司);KQ318型首饰超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);BP-211D分析电子天平(德国Sartorius公司，1/10万级);ZFQ85A旋转蒸发器(上海医械专机厂有限公司)。红景天苷对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：110818-200404);红景天酒(四川省草原研究所提供，批号：060518，060810，070312);甲醇为色谱纯，水为二次蒸馏水，其余试剂均为分析纯。

　　2方法与结果

　　2.1色谱条件色谱柱为Shim-packVP-ODSC18(250mm×4.6mm，5.0μm);流动相为甲醇-水(18∶82);检测波长278nm;流速1.0ml/min;进样量5.0μl;柱温30℃。

　　2.2对照品溶液的制备精密称取已干燥至恒重的红景天苷对照品7.20mg，置于50ml容量瓶中，加入甲醇超声溶解，定容至刻度线，摇匀，制成质量浓度为0.144mg/ml对照品溶液。

　　2.3供试品溶液的制备精密量取红景天酒20ml，减压浓缩至无乙醇味，用甲醇少量多次超声溶解，溶解转移至10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度线，摇匀，再超声10min，静置。吸取上清液，用0.45μm有机膜过滤，取续滤液作供试品溶液。

　　2.4系统适应性试验分别取对照品溶液和供试品溶液，自动进样5.0μl，记录色谱图。结果见图1。采用选定的色谱条件，红景天苷与体系中的其它物质能完全分离，保留时间13.592min，理论塔板数以红景天苷计算大约5500。a-对照品b-供试品1-红景天苷图1高效液相色谱图

　　2.5线性关系考察精密吸取对照品溶液0.5，1.0，3.0，5.0，7.0，9.0μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值(Y)为纵坐标，红景天苷进样量(X)为横坐标绘制标准曲线，计算，得回归方程Y=1177.9X-3426.4，r=0.9999。结果表明，红景天苷进样量在0.072～1.296μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。

　　2.6精密度实验精密吸取对照品溶液5.0μl，在同一条件下重复进样5次，按上述色谱条件进行测定，得红景天苷峰面积。结果红景天苷峰面积的RSD=0.26﹪(n=5)，表明仪器精密度良好。2.7稳定性实验取同一供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，分别在0，2，4，8，12，16，24h进样5.0μl，测定红景天苷峰面积。结果结果红景天苷峰面积的RSD=0.72%，表明供试品溶液在24h内稳定性良好。

　　2.8重复性实验取同一批号(批号：060518)样品20ml，按“2.3”项下方法操作，制备供试品溶液5份，每份精密吸取5.0μl，按“2.1”项下色谱条件测定，测得红景天苷峰面积。结果，红景天苷的平均浓度为32.20μg/ml，RSD=0.89﹪(n=5)，表明该方法的重复性良好。

　　2.9加样回收率实验取已知红景天苷含量的红景天酒18.0ml，分别准确加入2.0ml红景天苷对照品溶液，按“2.3”项下方法操作，制备供试品溶液5份，测定峰面积，计算加样回收率。结果见表1。表1加样回收率实验结果

　　2.10样品含量测定取不同批号的3批样品，每个批号平行量取5份，按“2.3”项下方法操作，制备供试品溶液。按“2.1”项下色谱条件测定，分别进样5.0μl，测定供试品峰面积，用外标法计算样品含量。结果见表2。表2样品含量测定结果

　　3讨论

　　3.1检测波长的选择取对照品适量，加入甲醇使其溶解，经紫外光谱测定，红景天苷在224nm和278nm处均有最大吸收峰，但由于在224nm处检测，溶剂有一定影响，且红景天苷和酪醇不能很好的分离，故选择278nm作为检测波长。

　　3.2流动相的选择本文考察了甲醇-水85∶15，90∶10，15∶85，16∶84，18∶82，20∶80，随甲醇比例的增加，红景天苷的保留时间减少，综合考虑后，选用甲醇-水18∶82，保留时间比一般文献报道的短，且相邻峰得到良好的分离效果。